目的 基于荧光共振能量转移（fluorescence resonance energy transfer,FRET）原理，建立奥密克戎变异株主蛋白酶（Omicron variant main protease,OM-Mpro）抑制剂高通量筛选模型，筛选新型OM-Mpro抑制剂。方法 利用大肠杆菌进行OM-Mpro原核表达，再以HisTrap亲和层析柱进行分离纯化。以FRET法进行OM-Mpro与野生型新型冠状病毒主蛋白酶（wild-type main protease,WT-Mpro）的酶活性测定并评价奈玛特韦的酶抑制活性。利用OM-Mpro抑制剂FRET高通量筛选模型对上市药物库进行高通量筛选。结果 利用大肠杆菌成功进行了OM-Mpro原核表达与分离纯化，其与WTMpro酶活性无显著差异。奈玛特韦对OM-Mpro和WT-Mpro具有等同的酶抑制活性，说明奈玛特韦对奥密克戎变异株依然有效。通过对上市药物库进行高通量筛选，发现西吡氯铵是混合型OM-Mpro抑制剂，其半数抑制浓度值为8.76μmol·L。结论 成功制备了高活性OM-Mpro并建立了OM-Mpro抑制剂FRET高通量筛选模型，初步证实了西吡氯铵是混合型OM-Mpro抑制剂，为广谱抗冠状病毒药物先导化合物的筛选与发现奠定了基础。
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